חכמים דורשים מספר פסוקים ביהושע הקשורים באופן ישיר או עקיף להקמת ערי המקלט.

הרוצח בשגגה יוצא מעיר המקלט במות הכהן הגדול. מי נחשב ככהן גדול למטרה זו? אם יש מספר כהנים גדולים, האם כולם צריכים למות או רק אחד מהם? מתוך דאגה שאנשי העיר עלולים להתפלל למות הכהן הגדול, אמותיהם היו מספקות מזון ובגדים לרוצחים בשגגה.

הגמרא דנה בתפילות שאין להן בסיס (כמו להתפלל שהכהן הגדול ימות) - האם הן מתקבלות?

מובאים תרחישים שונים בנוגע לעיתוי מותו של הכהן הגדול - אחרי ההריגה אך לפני שבית הדין קבע שהרוצח צריך ללכת לעיר המקלט, או אחרי פסיקת בית הדין אך לפני שהרוצח הגיע לעיר, וכו'. בכל אחד מהתרחישים האלה, האם הרוצח בשגגה משתחרר או לא?