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#24 Preparo de amostra em LC-MS: Estratégias para sensibilidade e seletividade reais | ProtonAction


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Vem aqui comigo, você já parou para pensar que a maior causa dos problemas na quantificação por LC-MS acontece antes mesmo de o analito chegar ao espectrômetro de massas (MS)?

 

Pois é: sem um preparo de amostra adequado, os dados não serão confiáveis, reprodutíveis e defensáveis em uma auditoria, validação ou publicação científica.

 

Então, a pergunta que você deve estar se fazendo é:

 

E como "tirar" interferências, preservar o analito e garantir sensibilidade no LC-MS?

 

Bom, é isso que você vai aprender neste vídeo.

 

Cada matriz (plasma, urina, formulação) tem sua complexidade própria. Sem um tratamento prévio, você enfrentará três grandes vilões:

 

1) Supressão do sinal (Efeito Matriz): É quando as moléculas da matriz competem pela ionização, diminuindo a intensidade e a sensibilidade do método.

 

2) Interferências: Outros componentes permanecem na amostra e podem “atrapalhar” o analito de interesse.

 

3) Baixa concentração do analito: Em muitas aplicações, o composto já está em nível traço (ng/mL, pg/mL). Sem pré-concentração, não há detecção.

 

Para contornar esses problemas, eu vou te mostrar, passo a passo, duas técnicas:

 

1) Extração Líquido-Líquido (LLE):

·        Seleção do solvente;

·        Ajuste de pH;

·        Forças que governam a extração: hidrofóbicas, dispersão, ligação de hidrogênio;

·        Como melhorar recuperação e limpeza.

 

2) Extração em Fase Sólida (SPE):

·        Condicionamento

·        Carregamento

·        Lavagem

·        Eluição

 

É como eu gosto de dizer: a qualidade da análise nasce fora do LC-MS. Não adianta ter o melhor LC-MS se a amostra chega suja!

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