Journal Club Imunoterapia Tumoral

Olá Malta

De volta com uma nova edição que espero seja do vosso apreço.

http://www.immunity.com/content/article/abstract?uid=PIIS1074761308000708

Olá,

Nesta edição do podcast apresento-vos o artigo "A

single

Naive CD8+ T cell precursor can develop into diverse effector and

memory subsets" por Stemberg et

al Immunity 2007, 27:985.

Este

artigo demonstra que um único precursor T naïve OT-1 pode gerar um

repertorio diverso de células T efectoras e T memória (memória

efectoras e memórias centrais). Este artigo vem redescrever o nosso

conhecimento sobre as origens das populações memória T.

Os autores transferem uma única célula T naïve OT-1 (CD45.1 +) num

ratinho naïve C57BL/6 (CD45.1  -) e estimulam as células com

bacteria Listeria monocytogenes expressando o antigénio OVA. 12 dias

após a estimulação e a transferência da célula precursora os autores

observam a expansão celular das células CD45.1+ com formação de células

memória efectoras (CD62L low, CD45RA +) e células memória centrais

(CD62L high, CD45RA+). Estas células memória são capazes de desenvolver

respostas memória após restimulação e mesmo quando a transferência

 das célula precursora ocorre após a estimulação antigénica.

Até breve.

Pedro

Olá malta…

Já eram quase 3 da manhã quando terminei

de editar esta edição e codificava o mp3

respectivo.  Quem corre por gosto não cansa!

Desta feita encontrei um artigo na sequência da

edição anterior -

continuamos no mundo do SIV e das suas respostas

imunológicas, sobre

introdução de mutações in

vivo num peptideo apresentado pelas moleculas do complexo

major de histocompatibilidade de classe 1 (MHC mamu-B*17).

Se este fenómeno não tem nada de muito

invulgar no mundo dos virus.

Mas, o que é invulgar e se torna o apelativo deste artigo

chamado ”

AIDS virus-specific CD8+ T lymphocytes against an imunodominant cryptic

epitope select for viral escape” JEM 2007 2004: 2505 por

Maness et al é o facto ser proveniente de um

quadro de leitura alternativo (ou altered reading frame) do gene env

do SIV. Mais curioso ainda é que este peptideo é

significativamente

imunogénico (capaz de induzir respostas

imunológicas mediadas por

linfócitos T CD8) e as respostas induzidas dominantes

comparadas com

outros peptideos do mesmo virus.

Vai disto, o virus para escapar a pressão

imunológica exercida pelos

linfócitos T CD8 específicos deste peptideo

criptico que são capazes de

reconhecer células infectadas com o virus em causa, realizam

a mutação

particular do peptideo de modo a alterar a sua sequência e

reduzir a

afinidade para a molécula de MHC classe I mamu-B*17.

O peptideo

mutado tem muita menos afinidade e não é

imunogénico e logo incapaz de

mobilizar os linfócitos T CD8 e estes não

consegue reconhecer células

infectadas com virus contendo a mutação em causa.

Também interessante o

facto que a mutação introduzida só

afectar o peptideo criptico, pois a

mesma mutação não altera a

sequência de amino ácidos do gene env de

onde o peptideo é proveniente (mutação

sinónima).

Estamos portanto em face de um fenómeno

estremamente curioso que dá

muito que pensar sobre as estratégias que os virus podem

introduzir de

modo a escapar ao controlo imunológico, e não

podemos deixar de

estrapolar situações semelhantes que podem

ocorrer para as células

tumorais. Estamos perante portanto a uma situação

de “ImunoEditing” ou

modificação antigénica mediada pelo

sistema imunológico.

Que tal?

Um abraço e boas leituras… ler

é aprender e abrir horizontes!

Pedro

Olá malta...

Após um mês de Janeiro cheio de peripécias, consegui gravar uma nova edição do podcast. Desta feita, descrevo-vos um artigo onde se utiliza a estratégia de "prime-boost" amelhorada com CpG e FLT3L para aumentar a sua eficácia objectiva num ensaio pre-clinico em macacos para o virus SIV.

O artigo chama-se "Adjuvanting a DNA vaccine with a TLR9 ligand plus Flt3 ligand results in enhanced cellular immunity against the simian immunodeficiency virus" publicado em 2007 no jornal JOURNAL EXPERIMENTAL MEDICINE.

Eu achei este artigo muito interessante por ser um artigo relatando um ensaio pré-clinico em primatas (Rhesus macaques), e tratar-se de um modelo de HIV (human immudeficiency virus) - SIDA em português. É claro que neste experimental de primatas tenta-se tratar os animais com a variante símia (SIV).

Outro factor interessante no artigo é o uso de uma estratégia de vacinação onde se utilizam dois vectores virais de origens distintas expressando os mesmo antigénios (SIV gag e pol) e HIV (Env e Nef). O uso de dois vectores distintos sequêncialmente chama-se prime-boost. O objectivo é evitar a neutralização do vector viral modificando a sua origem mantendo em comum o antigénio de interesse. Assim sendo o vector inicial é o virus Vaccinia e depois o vector seguinte é o virus Ankara.

Os autores testam o ligando de Toll-like receptor9 (Desoxiribonucleotideos CpG) e o uso de Flt3 ligand para potenciar os efeitos da estratégia de prime-boost. Os autores descrevem que a vacina assim utilizada induz uma elevada mobilização de células dendriticas (células apresentadoras de antigénios profissionais do sistema imunológico) e em estado maturo de diferenciação. Como resultados os autores mostram que no grupo de animais tratado com Flt3L e CpG, o número de linfócitos T CD8 especificos do antigénio Gag do SIV é superior a todos os outros grupos animais testados, e que em termos clinicos a vacina tem efeitos profiláticos na protecção dos animais contra um infecção mucosal por via rectal com o virus SIV.

Os dados apresentados são extremamente encorajadores para o uso desta estratégia prime-boost com CpG e Flt3L em estudos pré-clinicos em humanos.

Dêem uma olhada e deixem os vossos comentários...

Olá, Viva.

Décima edição do podcast "Journal Club

Imunoterapia tumoral".

Apresento-vos o artigo Dendritic cell preactivation

impairs MHC class II presentation of vaccines and endogenous viral

antigens Young et al 2007 PNAS 104: 17753

Este artigo demonstra que células dendriticas no seu estado

maturo in vivo

são incapazes de induzir respostas imunológicas

específicas de um antigénio, e sobretudo que a

razão que justifica este comportamento é a

ausência de sintese das moléculas alpha e beta do

heterodimero MHC classe II após

maturação. Os autores observam que mesmo

após maturação, as células

continuam a apresentar capacidade de endocitose e capacidade de

degradar antigénios solúveis e

antigénios endogenos à célula

dendritica, tais como antigénios virais.

As células

dendriticas são células fundamentais no

desenvolvimento de respostas imunológicas in vivo sobretudo

pela sua capacidade de induzirem a activação de

linfócitos T naive.

Para induzir a maturação das células

dendriticas in vivo, os autores injectam CpG 1668 em ratinhos, o que

gera uma maturação generalizada das

células dendriticas encontradas no baço destes

ratinhos. Semelhante fenómeno pode ser encontrado em

condições de choque séptico ou em

situações de infecções

parasiticas como por exemplo a malária.

O CpG são moléculas de ADN lineares ricas em

sequências de nucleotideos citosina e guanina e que tem a

propriedade de induzir fortes respostas imunológicas. Tal

acontece porque existem nas células do sistema

imunológico receptores que se ligam a este tipo de

moléculas muito comuns em agentes infecciosos: os receptores

Toll-like.  Estes receptores Toll-like são

vários e reconhecem cada um deles um tipo

específico de moléculas, eg TLR9 reconhece CpG,

TLR4 reconhece LPS, TLR3 reconhece Poly I:C. Para mais

informações deem uma olhada no link seguinte do wikipedia.

Embora in vitro

existam vários estudos sobre os aspectos funcionais das

células dendriticas, estudos in vivo são

raros. Este estudo é por isso valioso para

reforçar o nosso conhecimento dos processos

imunológicos.

Um abraço e até breve.

Pedro

Olá Malta

Último podcast antes da chegada do Natal. Para terminar este

semestre de actividade do "journal club" decidi apresentar-vos um

artigo de referência do grupo de Robert

Schreiber onde é descrita a fase de equilibrio

ténue entre o sistema imunológico e o

desenvolvimento tumoral.

No artigo recentemente publicado no jornal Nature, Koebel

e colaboradores desenvolvem um modelo de desenvolvimento

tumoral tirando partida da actividade tumorigénica do

3'-methilcolanthrene, um produto químico estremamente

perigoso e carcinogénico entrado no fumo do tabaco.

Após uma simples aplicacao em duas estirpes de ratinhos e

removendo do estudo todos os ratinhos que apresentaram crescimento de

tumores durante um periodo superior a 200 dias, os autores

seleccionaram os ratinhos onde se detectavam pequenas massas tumorais

palpaveis que nao proliferavam - os ratinhos apresentavam tumores em

estado de "letargia".

Estes ratinhos com tumores latargicos ou dormentes foram posteriormente

tratados com anticorpos que os tornava imunodeficientes (tratamento

contra linfócitos CD4 e CD8, ou tratamento

anti-interferão gamma ou anti-IL-12) para o sistema

imunológico adaptativo, e observaram que os tumores

até então dormentes se tornaram activos e os

ratinhos não consigam controlar os tumores em plena

expansao.  Portanto, estes ratinhos mantinham os tumores

estáveis devido ao seu sistema imunológico, que

uma vez aniquilado, estes tumores tornavam-se letais.

Os autores demonstram que estes tumores que surgem apartir de massas

tumorais dormentes sao estremamente tumorigenicos e pouco

imunogénicos (incapazes de estimular o sistema

imunológico), uma vez que estes tumores foram

progressivamente seleccionados pelo sistema imunologico. Por outras

palavras, progressivamente são eliminadas as variantes

tumorais que sao possiveis de ser reconhecidas pelo sistema

imunológico, restando variantes que não

são reconhecidas e portanto escapam ao controlo.

Embora as evidencias moleculares não sejam mostradas no

artigo, este trabalho é importante para a

complementação da teoria dos 3 És:

eliminacao, equilibrio e escape desenvolvida por este grupo e que

explica o desenvolvimento tumoral num individuo imunologicamente

competente.

Um forte abraço e espero os vossos comentários.

Pedro

Olá malta!

Neste oitava edição do Podcast Imunoterapia

Tumoral apresento-vos o artigo de Gakamsky

et al, publicado recentemente no jornal PNAS vol 104: 16639

de 2007.

Este artigo vem pela primeira vez corroborar com dados de

biofísica os dados apresentadas por vários

trabalhos baseados em cristalografia do complexo TCR/peptideo-MHC, e

onde é sugerida

de o domínio do CDR3 é capaz de uma certa

mobilidade e capacidade de adaptar-se ("fiting") à

superfície tri-dimensional do complexo

peptídeo-MHC.

Para relembrar: o TCR é o receptor da célula T,

que reconhece peptídeos (oligopeptideos) apresentados pela

molecula Major de Histocompatibilidade (MHC). As células T

são de dois tipos: CD4 ou CD8, sendo as células T

CD4, apresentando o co-receptor CD4 e reconhecendo peptides

apresentados pelo moleculas MHC de classe II; e as células T

CD8 apresentando o co-receptor CD8 e reconhecendo peptídeos

apresentados pelas moleculas MHC classe I.

No caso das respostas adaptativas, o reconhecimento de

peptídeos apresentados por moléculas MHC pelas

células apresentadoras de antigénios é

fundamental para a modulação das respostas

imunológicas (nomeadamente via células T CD4) e

para a criação de respostas efectoras capazes de

eliminar situações anómolas tais como

infecções virais, parasitarias ou tumorais (via

células T CD8).

A variabilidade dos TCR é enorme (10^13),

mas também enorme o número de

sequências de amino ácidos apresentados pelas

moléculas MHC. Por cristalografia sugeriu-se que o

domínio CDR3 do TCR, que reconhece sobretudo o complexo

peptideo-MHC tem flexibilidade, podendo-se adaptar em várias

conformações, podendo assim cobrir mais

sequencias peptideo-MHC doque se fosse rigido. Este artigo que

apresento, mostra por estudos de FRET (Fluorescence Resonance Energy

Transfer) que as energias envolvidas e a rapidez do processo

é compativel com os estudos cristalográficos e

abre assim uma nova maneira de interpretar o reconhecimento de

peptideos pelo TCR.

Espero pelos vossos comentários e sugestões...

Pedro

Olá malta.

Sejam bem-vindos a uma nova edição do podcast

Journal Club Imunoterapia Tumoral.

Nesta edição apresento-vos o artigo de Cao et al que foi recentemente

publicado no jornal Immunity.

Este artigo apresenta as primeiras evidências in vivo que as

células T reguladoras induzem a supressão da

resposta anti-tumoral por induzirem a morte celular de

células efectoras anti-tumorais (células NK e

células T CD8+) por uma via dependente das proteinas

Granzima B e Perforina.

Um artigo a ler sem dúvida.

Um forte abraço.

Pedro

Nova edição onde apresento-vos um artigo sobre um ensaio clinico de imunoterapia nao randomizado sobre linfomas EBV de Hodgkins e nao Hodgkins. Neste ensaio clinico celulas T CD8 são geradas in vitro contra um antigenio subdominante de EBV - LMP2, atraves do uso de células dendriticas e celulas B linfoblasticas autologas de pacientes com linfoma. As CTLs assim geradas foram transferidas adoptivamente nos pacientes em varias infusoes e resultaram segundo os autores em respostas clinicas completas, ou parciais e estabilizacao da doenca, oque neste tipo de cancros não é meritório. Eis portanto um artigo que apresenta dados que merecem ser utlizados como referencia demonstrando a eficacia e o potencial da imunoterapia no tratamento de tumores.

Olá malta.

Nesta edição apresento-vos um artigo onde as celulas T gamma delta provenientes de linfocitos infiltrantes de cancro da mama humano apresentam capacidade reguladora. Estas células apresentam a capacidade de inibir a proliferação de linfocitos e a função de células dentriticas maturas. Esta actividade reguladora pode ser revertida pela acção de ligandos de TLR8.

Espero que gostem e deixem os vosso comentários.

Um abraco

Pedro