Cốt truyện trong Diablo phần 1 diễn ra xoay quanh cuộc chiến giữa thiên đường và địa ngục tại làng Tristram. Lũ quỷ đang tấn công ngôi làng từ phế tích nhà thờ Tristram.
Người chơi vào vai một hiệp sĩ có nhiệm vụ bảo vệ làng bằng cách xâm nhập vào hệ thống hầm mộ và hang động dưới nhà thờ. Qua những cuốn sách cổ trong từng màn chơi, người chơi dần biết được nhiều thông tin về quỷ Diablo.
Cuối cùng, người chơi xuống được hang ổ của Diablo ở tầng dưới cùng và tiêu diệt được hắn ta để giải cứu làng Tristram.